ISSN:
1432-119X
Source:
Springer Online Journal Archives 1860-2000
Topics:
Biology
,
Medicine
Description / Table of Contents:
Zusammenfassung Die früher beschriebene Methode zur fluoreszenzmikroskopischen Darstellung der DNS mit Pseudoisozyanin (Sterba 1963) wurde auf ihre Anwendbarkeit bei Oozyten von Amphibien und Teleosteern geprüft. Die Methode erwies sich bei Triturus alpestris, T. vulgaris, T. cristatus, Pleurodeles waltlii, Rana esculenta, Rana temporaria sowie bei Salmo trutta fario und S. trutta irideus hinsichtlich ihrer Empfindlichkeit und der Klarheit der Darstellung anderen histochemischen Verfahren überlegen. Im Gegensatz zu den genannten Arten, bei denen die Darstellung der Lampenbürstenchromosomen in allen Oogenesestadien gelang, ließen sich diese bei Cypriniden (Barbus conchonius, Phoxinus phoxinus) mit Pseudoisozyanin nicht nachweisen. Durch Fermentbehandlung und Säureextraktionen konnte der Beweis erbracht werden, daß die für den positiven Ausfall der Pseudoisozyaninreaktion verantwortliche Polymerisation der Farbstoffmolekel nur eintritt, wenn DNS vorhanden ist. RNS liefert mit der von uns angewandten Methode keine positive Reaktion. Blockade- und Deblockadeversuche machen wahrscheinlich, daß die Phosphorsäuregruppen der DNS für die Farbstoffpolymerisation verantwortlich sind. Die mit der Pseudoisozyaninreaktion erhaltenen Resultate bedürfen der Kontrolle mit anderen Nukleinsäurenachweisen. Diese können an den gleichen Präparaten durchgeführt werden.
Notes:
Summary A previously described method for the determination of DNA with pseudoisocyanin (Sterba 1963) was tested for its suitability on oocytes of amphibia and Osteichthyes. In Triturus alpestris, T. vulgaris, T. cristatus, Pleurodeles waltlii, Rana esculenta, Rana temporaria, as well as Salmo trutta fario and S. trutta irideus this method proved to be superior to other histochemical methods. In contrast to the above mentioned species, in which lampbrush chromosomes were demonstrable in every stage of the oogenesis, they were not detectable with the pseudo-isocanin method in cyprinidae (Barbus conchonius, Phoxinus phoxinus). By treatment with enzymes and by acid extraction it was possible to prove that a polymerisation of the molecules, the process that is responsible for the positive results with the pseudo-isocyanin method, takes only place if DNA is present in the preparation. RNA gives no positive results with this method. Blocking-and de-blocking experiments seem to indicate that the phosphoric acid groups in the DNA are responsible for the polymerisation of the dye. The results obtained by the pseudo-isocyanin reaction need to be controlled by other methods for the determination of nucleic acids; the tests can be done on the same tissue preparation.
Type of Medium:
Electronic Resource
URL:
http://dx.doi.org/10.1007/BF00306134
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